螺旋藻粉中藻蓝蛋白含量测定的标准方法研究

螺旋藻粉中藻蓝蛋白含量测定的标准方法主要有分光光度法，此外还有基于电泳技术的测定方法，以下是具体介绍：

分光光度法：《SN/T 1113-2002进出口螺旋藻粉中藻蓝蛋白、叶绿素含量的测定方法》规定了进出口螺旋藻粉中藻蓝蛋白含量检验的抽样、制样和分光光度测定方法，该方法原理是样品用磷酸盐缓冲液溶解，置冰箱中冷冻、融解，使色素蛋白析出，分离后的提取液用分光光度法测定。具体操作是称取试样0.25g-0.5g，精确至0.0001g，用 0.1mol/L 磷酸二氢钾溶液与0.1mol/L 磷酸氢二钾溶液（45+55，V/V）混合而成的pH值为7.0的磷酸盐缓冲液溶解，超声振荡5min，定容于250mL容量瓶中，摇匀，将溶液全部转入250mL广口塑料瓶，置于-20℃冰箱内冷冻12h或放置过夜，取出解冻，摇匀。取部分溶液于离心管中，在3000r/min转速下离心15min，取上层清液，用1cm比色皿，在分光光度计上分别测定620nm、652nm、562nm处的吸光度，用缓冲液做空白，再根据相应公式计算出试样中藻蓝蛋白的质量分数含量。

电泳法：如一种通过亚基定性、定量螺旋藻中藻蓝蛋白的方法，运用十二烷基硫酸钠聚丙酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）方法，通过考马斯亮蓝染色剂，将蛋白染色为可见条带，依据藻蓝蛋白α（分子量为21kDa）、β（分子量为14kDa）亚基条带特征将藻蓝蛋白与其他蛋白鉴别，凝胶成像系统分析藻蓝蛋白α亚基条带发光量与藻蓝蛋白含量的线性关系，根据α亚基条带体积计算藻蓝蛋白含量。此方法不需分离纯化藻蓝蛋白，可以单一精准测定其含量，相较于其他电泳定量方法，利用α亚基条带体积作为参照条件，比条带总体积为参照条件更加灵敏、准确。

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